البريد الإلكتروني

العمليات القياسية لتفاعل البكر

يتم تقسيم عملية بكر القياسية إلى ثلاث خطوات:


تمسخ الحمض النووي: (90 ℃ -96 ℃): يخضع قالب الحمض النووي المجدول المزدوج لانقسام الرابطة الهيدروجينية تحت العمل الحراري ، وتشكيل الحمض النووي أحادي الجديلة


التلدين: (60 ℃ -65 ℃): مع انخفاض درجة حرارة النظام ، يرتبط التمهيدي بقالب الحمض النووي ، ويشكل حبلا محليًا مزدوجًا.


الامتداد: (70 ℃ -75 ℃): تحت تأثير إنزيم Taq (عند حوالي 72 ℃ ، مع أفضل نشاط) ، يتم استخدام dNTP كمادة بدء ، يمتد من نهاية 3 "من التمهيدي في اتجاه نهاية 5" → 3 "، لتجميع خيوط الحمض النووي المكملة للقالب.


بعد كل دورة من التمويه والتلدين والإمتداد ، يتضاعف محتوى الحمض النووي. في الوقت الحاضر ، يمكن أن يتضاعف بعض البوليمر في وقت قصير حتى لو لم يكن نشاط إنزيم Taq مثاليًا بسبب منطقة التضخيم القصيرة. لذلك ، يمكن استخدام طريقة من خطوتين ، والتي تنطوي على الصلب وتمتد في وقت واحد بين 60 ℃ و 65 ℃ ، للحد من ارتفاع درجة حرارة واحدة وتقليل العملية وتحسين سرعة التفاعل.





المنتجات